产品目录

本试剂盒是在病毒RNA快速抽提基础上，结合吸附柱对RNA进一步纯化。获得的RNA纯度较高，OD260/OD280比值一般为2.0左右，可直接用于RT-PCR和荧光RT-PCR等后续实验。

本制品回收率极高，尤其适合于整合到临床RT-PCR检测试剂盒中，且能用于提取其他液体样品和微量样品。

• 操作简单快速，整个过程20分钟左右完成。
  
• 灵敏度高，RT-PCR检测病毒的最终灵敏度可以达到50拷贝/mL。
  
• 使用安全，操作过程中无需使用酚、氯仿等有毒试剂。
  
• 适用于各种材料，包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无细胞材料。

• 自备试剂：无水乙醇、DEPC、生理盐水（对拭子样品）等。
  
• 按瓶身标签说明在RPE Solution中加入相应量的无水乙醇，混匀后在瓶身做好标记。于室温密封保存。每次使用后将瓶盖盖紧，以保持RPE Solution中的乙醇含量。（11mL RPE Solution中应加入44mL无水乙醇；22mL RPE Solution中应加入88mL无水乙醇。）

• 样品处理：
  
  • 对于液体病毒样品：在1.5mL离心管中加入0.1～0.2mL液体病毒样品。如果病毒需要富集，可以将1.5mL液体在4℃ 24000g冷冻离心60min，移弃1.3mL后剩下的0.2mL用于第2步处理。
    
  • 对于拭子样品：将一个拭子放入离心管中，加入1mL自备的生理盐水，振荡器上充分振荡半分钟，然后转移0.2mL到1.5mL塑料离心管中，用于第2步处理。
• 加入0.6mL Buffer Rlysis-VG到第一步得到的0.2mL样品中，振荡30 s混匀后室温放置10min。
  
  • Buffer Rlysis-VG在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
• 加入0.6mL无水乙醇，盖上管盖并涡旋振荡15sec。
  
• 短暂离心后将700μL溶液转移到离心吸附柱中，室温放置2min。
  
• 12000rpm室温离心1min，弃穿透液，把吸附柱放回收集管中。
  
• 将剩余溶液短暂离心后全部转移到步骤4的离心吸附柱中，室温放置2min。
  
• 12000rpm室温离心1min，弃穿透液，把离心吸附柱放回收集管中。
  
• 加入500μL RPE Solution到离心吸附柱中，12000rpm室温离心1min，弃穿透液，把离心吸附柱放回收集管中。
  
• 重复第8步1次。
  
• 12000rpm室温离心2min，弃含穿透液的离心管。
  
• 将离心吸附柱套入到一个新的自备的RNase-free的1.5mL离心管中，在离心吸附柱的滤膜的中部加入30～100μL DEPC-treated ddH2O，然后室温放置2min。
  
• 12000rpm室温离心2min，收集管中的样品即为病毒RNA。
  
  • RNA样品可以直接用于RT-PCR或逆转录反应，也可放-80℃长期保存。